Purificación de proteínas antigénicas obtenidas del producto de excreción y secreción de Cotylophoron cotylophorum.
Palabras clave:
<i>Cotylophoron</i>, proteínas, Bovino, antígenoResumen
El diagnóstico de Cotylophoron cotylophorum por la técnica sedimentación y tamizado, es poco eficiente cuando la carga parasitaria es baja y tienen un poca sensibilidad; al diagnosticar sólo la presencia de huevos en heces. En el presente estudio se purificaron proteínas del producto de excreción – secreción de formas adultas de C. cotylophorum para evaluar su antigenicidad en una inmunoelectrotransferencia (Western Blot) y su uso diagnóstico en un inmunoensayo (ELISA). Los antígenos obtenidos después de 16 horas de incubación en medio Mínimum Essential Eagle (MEM), de 1200 especímenes de parásitos adultos de C. cotylophorum</i>, recolectados del rumen de bovinos sacrificados en el Matadero Industrial Centroccidental (MINCO), fueron purificados y concentrados por ultra filtración. Las proteínas antigénicas se identificaron en una electroforesis (SDS – PAGE) y Western Blot utilizando suero hiperinmune obtenidos de conejas inmunizadas con las proteínas purificadas del producto de excreción y secreción de C. cotylophorum. Nueve bandas fueron identificadas con pesos moleculares de: 17, 24, 43, 56, 62, 76, 83, 105 y 121 KDa, y tres de estas bandas (62, 76 y 105 KDa), fueron reconocidas por el suero sanguíneo de 4 bovinos positivos por examen coprológico a C. cotylophorum, de las cuales la proteína de 76 kDa mostró la mayor reactividad. Los antígenos purificados pueden ser usados para desarrollar ensayos inmunoenzimáticos más sensible y específico, de gran utilidad en el diagnóstico y estudio epidemiológico de C. cotylophorum en Venezuela.
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